植物組織培養(yǎng)是20世紀初發(fā)展起來的一門新興技術，隨著這項技術的日益完善，其應用也越來越廣泛。但是在組織培養(yǎng)過程中，常常會遇到污染問題使實驗無法進行下去，甚至導致整個實驗失敗，給科研和工廠化生產帶來損失。
污染是指在植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料滋生雜菌，最終導致培養(yǎng)失敗的現象。常見的污染類型包括：由霉菌引起的真菌性污染、多由外植體帶菌引起的細菌性污染、長期多次繼代引起的內生菌污染以及農桿菌污染等。面對植物組培污染問題，我們通常采取在培養(yǎng)基中加入適量的抗生素（如青霉素、鏈霉素、氯霉素等）來抑菌。但是抗生素一般不穩(wěn)定，遇酸、堿或加熱都易分解而失去活性。而且單一抗生素抑菌容易產生抗藥性，一旦停止使用，污染率就會顯著上升。同時，高濃度的抗生素會影響植物的生長。
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為解決上述問題，我們推薦專業(yè)植物組培高效廣譜性抗菌劑PPM?，它可以有效預防和清除由于空氣、滅菌不徹底、交叉污染、外植體消毒等各種原因導致的植物組培苗的真菌、細菌、內生菌和農桿菌污染?？梢约尤肱囵B(yǎng)基高溫滅菌；而且在合理使用劑量下，不會對植物的生長產生任何影響。
1、常規(guī)污染預防用量：
一般推薦使用濃度為0.05%-0.2%（1L培養(yǎng)基中加入0.5-0.75ml PPM?）；愈傷增殖， 器官形成，胚性組織發(fā)育等使用濃度為0.05%-0.075%。
2、植物內生菌污染處理：
?種子：PPM?不推薦用于直接處理含有大量的細菌或真菌孢子的種子滅菌；對于種子離體萌發(fā)，建議先采用傳統方法消毒，然后置于含 2-3%PPM?的全培養(yǎng)基礎鹽溶液中，輕輕攪拌4-12小時，此過程千萬不能添加Tween20和調節(jié)pH，處理完成以后直接插入含有 PPM?(草本植物0.05-0.1%，木本植物0.2%)的培養(yǎng)基里進行培養(yǎng)。
外植體：：以 1cm 外植體為例，將外植體置于含 4-5%PPM?的全培養(yǎng)基礎鹽溶液中，輕輕攪拌4-12小時，此過程千萬不能添加 Tween20和調節(jié)pH，處理完成以后直接插入含有PPM?(草本植物 0.05-0.1%，木本植物0.2%)的培養(yǎng)基里進行培養(yǎng)。
塊莖，球莖和鱗狀物的觀賞植物樣本：將其整體放入消毒劑中攪拌消毒處理以后， 用水沖洗干凈，將材料切成薄片，置于含 4-5%PPM?的全培養(yǎng)基礎鹽培養(yǎng)液中，輕輕攪拌4-12小時，此過程千萬不能添加Tween20 和調節(jié)pH，處理完成以后無需沖洗直接插入含有 0.1-0.2%的PPM?的培養(yǎng)基里進行培養(yǎng)。
3、如果厚的外植體、污染嚴重的植株、種子等樣本經過以上處理仍得不到理想效果，可嘗試以下操作：
將材料浸泡在水中持續(xù)攪拌處理(松軟組織攪拌1小時，硬實組織攪拌2小時)
將材料在含50%的PPM?全培養(yǎng)基礎鹽溶液中攪拌處理5-10分鐘，此過程千萬不能添加 Tween20 和調節(jié)pH
無需沖洗，將處理過的材料直接加入到培養(yǎng)基中即可。對于真菌污染，可在培養(yǎng)基中加入適當濃度的PPM?。對于真菌細菌混合性污染，建議在培養(yǎng)的第一個月的培養(yǎng)基中加入0.05%-0.2%的PPM?
4、嚴重污染材料污染去除與搶救（重污染不超過一周）
將污染的材料至于流水中用軟刷刷洗，然后置于含50% PPM?的無菌水溶液中攪拌5-15分鐘；對于細菌或者混合性污染，建議使用 100% PPM?與 0.6g/L 的檸檬酸無菌水溶液按 1：1 混合的低 pH(2.8-3.2)的酸性溶液處理
處理后的材料無需清洗，直接插入含0.05%-0.25的PPM?的培養(yǎng)基中培養(yǎng)至少一個月以上，其中前10天需要弱光培養(yǎng)
5、農桿菌的去除
共培養(yǎng)以后，將樣本用無菌水清洗，然后將樣本浸沒在 100% PPM?（補充4X的培養(yǎng)基鹽溶液）中處理2分鐘，取出后用無菌紙吸干后并置于常用抗性培養(yǎng)基中培養(yǎng)，3 周后，更換到只含有0.05%-0.075% PPM?(無常用抗生素)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。
在所有 PPM?消毒處理外植體的過程中，盡量保證容器的體積足夠大，并使外植體材料所有面積與含PPM的處理溶液充分接觸，以保證消毒效果；
如果外植體出現高度氧化現象，不要扔棄，大約50%的外植體在 4-6 周內即可恢復
50% PPM? 的處理溶液可以重復使用但是不推薦，因為使用次數和效果受外植體的體積與接種密度的影響。將50% PPM?的處理溶液保存在4oC可適當延長其活性，一般可使用不超過10次。如果必要，建議配制2份50% PPM?溶液，一份用于外植體消毒內生菌污染，另一份用于消除“培養(yǎng)過程中”的輕度污染材料搶救，第二份溶液在每次處理過后需要用 0.2mm濾器過濾
如果50%PPM?溶液處理效果不理想，可采用100%PPM?溶液進行處理，處理方法相同，但使用次數不得超過10次。
產品信息：
產品已發(fā)表文獻：
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